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非洲猪瘟病毒间接 ELISA 抗体检测试剂盒

非洲猪瘟病毒间接 ELISA 抗体检测试剂盒

产品型号:

产品品牌:云境天合

更新时间:2024-07-14

非洲猪瘟病毒间接 ELISA 抗体检测试剂盒是用来检测血清样品中的非洲猪瘟病毒抗体水平的试剂,可搭配大家的非洲猪瘟检测仪进行非洲猪瘟病毒的检测,如有需求欢迎咨询大家。
产品详情

非洲猪瘟抗体 ELISA 检测试剂盒 (CAT.#:E25)

1.用途

用于检测血清样品中的非洲猪瘟病毒抗体水平。


2. 原理概况 

本试剂盒采用间接 ELISA 法检测血清中的非洲 猪瘟抗体。其基本原理如下:用重组蛋白抗原制备包 被微孔板,HRP 酶标记物为抗猪 IgG。检测时,向微 孔板中加入稀释后的待测样品,洗板后,加入 HRP 标记抗体,如果血清中含有非洲猪瘟抗体,则抗体会 与酶标板上的包被的抗原结合,酶标抗体也会与血清 中的非洲猪瘟抗体结合,加入底物后,颜色反应的深 浅与样品中存在的非洲猪瘟抗体的量成正比。 


3. 试剂盒组份 

1). 包被板:96T(12 条?8 孔,2 块)。

2). 酶标记物:21.0ml/瓶,1 瓶。

3). 样品稀释液:100.0ml/瓶,1 瓶。含蛋白的缓冲液, 可作为阴性质控使用。

4). 阳性质控:1.0ml/瓶,1 瓶。含有非洲猪瘟抗体。

5). 洗液:60.0ml/瓶,1 瓶。20 倍浓缩液,用前稀释。 含有非离子去垢剂。 

6). 底物 A:14.0ml/瓶,1 瓶。含有过氧化氢的缓冲 液。

7). 底物 B:14.0ml/瓶,1 瓶。含有 TMB 的缓冲液。

8). 终止液:14.0ml/瓶,1 瓶。含有硫酸的缓冲液。

9). 板贴、说明书、自封袋:1 套。


4. 非洲猪瘟病毒间接 ELISA 抗体检测试剂盒意事项

1). 不同批次的组份不可混用,且只能在效期内使 用。

2). 如果待检标本含有悬浮物、絮状物等不溶物,请 离心去除。且含有叠氮钠的标本不可用。


5. 试剂准备

1). 测试前将试剂盒组份置于室温(18-25℃)平衡 30 分钟,测试后应马上放回 2-8℃保存。 

2). 洗涤液:将浓缩洗液按照 20 倍比例用蒸馏水稀 释,混匀后备用。 

3). 样品准备:按照常规方法制备血清,用试剂盒中 配套的稀释液稀释,样品按照 1:100 稀释。(比 如:5?l 样品加入到 495?l 样品稀释液中) 


6. 检测步骤 

1). 取出所需要的板条。剩余的板条装入自封袋中, 置于 2-8℃保存。 

2). 先向每孔中加入 100?l 稀释后的待测样品、阴性 质控(样品稀释液)、阳性质控(不稀释),其中 阴性质控重复加两孔,阳性质控重复加两孔。 

3). 轻轻震动 10-20 秒混匀,贴上板贴。 

4). 置于 37℃温育 30 分钟。扣除孔中液体,并用洗 液洗涤 5-7 次。在干净的纸巾或毛巾上拍干,尽 量去除残留的水分。 

5). 每孔中加入 100?l 的酶标记物,轻轻震动 10-20 秒混匀,贴上板贴。 

6). 置于 37℃温育 30 分钟。扣除孔中液体,并用洗 液洗涤 5-7 次。在干净的纸巾或毛巾上拍干,尽 量去除残留的水分。 

7). 每孔依次加入 50?l 底物 A 和 50?l 底物 B,轻轻 震动 10-20 秒,置于 37℃避光反应 15 分钟。 

8). 每孔加入 50?l 终止液,轻轻震动几次混匀。使 蓝色液体完全变为黄色液体。

9). 在 10 分钟内,测量 450nm 处的吸光度(OD450)。 


7. 结果判断 

1). 阴阳性质控平均值计算 阳性质控平均值 =(阳性质控 1+阳性质控 

2)/2 阴性质控平均值= (阴性质控 1+阴性质控 2)/2 2). 实验有效性判定:应满足, 阳性质控平均值 – 阴性质控平均值?0.500 阴性质控平均值?0.400 

3). 样品 S/P 值计算: S/P=(样品 A- 阴性质控平均值)/(阳性质控平均 值 – 阴性质控平均值) 

4). 结果判定: 1 阴性:S/P?0.20; 2 阳性:S/P?0.20。 

8. 储存条件及效期 

2-8℃保存,有效期为 12 个月。


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